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液相色譜儀的操作過程如下:
1. 翻開HPLC工作站(包含計算機(jī)軟件和色譜儀),銜接好活動相管道,銜接檢測體系。
2. 對抽濾后的活動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3.過濾活動相,根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。
4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單,點擊manual,進(jìn)入手動菜單。
5. 有一段時刻沒用,或許換了新的活動相,需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵,直接在泵的出水 口,用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥,需求在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖刷時速度不要超越10ml/min。
6. 調(diào)理流量,初度運(yùn)用新的活動相,能夠先試一下壓力,流速越大,壓力越大,通常不要超越2000。點擊injure,選用適宜的流速,點擊on,走基線,調(diào)查基線的狀況。
7. 規(guī)劃走樣辦法。點擊file,選擇select?users?and?methods,能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹立一個新的辦法,點擊new?method。選擇需求的配件,包含進(jìn)樣閥,泵,檢測器等,根據(jù)需求而不一樣。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣辦法需求包含:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,通常2-5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換;d.走樣時刻,隨不一樣的樣品而不一樣。
8. 進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法,點擊start。進(jìn)樣,一切的樣品均需過濾。辦法走完后,點擊postrun,可記載數(shù)據(jù)和做符號等。悉數(shù)樣品走完后,再用上面的辦法走一段基線,洗掉剩余物。
9 關(guān)機(jī)時,先關(guān)計算機(jī),再關(guān)液相色譜。